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凝膠過濾層析中和凝膠電泳中的分子篩效應有什么不同
作者:  Admin       瀏覽:       發布時間:  2021-07-30
  凝膠過濾層析中和凝膠電泳中的分子篩效應有什么不同
 
  凝膠過濾層析也稱分子篩層析、排阻層析。是利用具有網狀結構的凝膠的分子篩作用,根據被分離物質的分子大小不同來進行分離。層析柱中的填料是某些惰性的多孔網狀結構物質,多是交聯的聚糖(如葡聚糖或瓊脂糖)類物質,小分子物質能進入其內部,流下時路程較長,而大分子物質卻被排除在外部,下來的路程短,當一混合溶液通過凝膠過濾層析柱時,溶液中的物質就按不同分子量篩分開了。
 
  而在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中,蛋白質的遷移率取決于它所帶凈電荷以及分子的大小和形狀等因素。進入分離膠后,由于聚丙烯酰胺的分子篩作用,小分子的蛋白質可以容易的通過凝膠孔徑,阻力小,遷移速度快;大分子蛋白質則受到較大的阻力而被滯后,這樣蛋白質在電泳過程中就會根據其各自分子量的大小而被分離。整塊膠板相當于一個分子篩。
  分子篩的第一個作用是晶體的外表面吸附多種吸附物。對于分子篩的研究表明,其外表面提供了一個精確的被吸附的分子尺寸。如果被吸附物的分子超過該尺寸,就不能進入晶體內部,只能被吸附在外表面。表面吸附作用(也發生在非結晶體的表面,如硅膠),這是很弱的,而在晶體內部有成千上萬的晶體空隙和槽,進一步吸附分子。分子篩由硅、鋁和氧原子組成。這些分子的離子電荷在穩定的晶體中加起來的總和應是零。為平衡正負負荷,加入鉀、鈉、鈣等正電荷離子。帶有正負離子的巨大的面被稱做吸附場。
 
  在吸附物與被吸附物之間有很強的吸引力,需要很大能量的(一般是熱能)才能消除吸引力,還原成篩子。隨著被吸附物的濃度增加,密度電荷場增強以至于幾乎沒有幾層被吸附分子存在。最終,被吸附物接近滿負荷,孔被填滿,類似于毛細管冷凝。如果水和苯(比如)分子都進入13X晶體,都有同樣的機會找到電荷場,吸附到晶體中,因為兩個分子都具有極性。
 
  可是,有些分子像氮氣、氬氣因為沒有明顯的極性,他們可能很弱地吸附在晶體上,當大量的極性分子涌入時被輕易地替換掉。在分子篩的吸附過程中,熱能源釋放到周圍。

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